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非酒精性脂肪肝造模詳細步驟【非酒精性脂肪肝造模外包】

2022-10-14 15:08:24

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺

        非酒精性脂肪肝造模實驗步驟由普拉特澤生物為大家總結(jié)分享,非酒精性脂肪肝在現(xiàn)在人群中發(fā)病年率越來越高,動物模型研究非酒精性脂肪肝的發(fā)病原理與機制是藥物研究的重要手段。普拉特澤生物動物實驗平臺專業(yè)提供各類脂肪肝造模外包服務(wù),本文就來跟大家一起學(xué)習(xí),非酒精性脂肪肝造模的詳細操作步驟~

        根據(jù)脂肪肝的不同病因,有多重造模方式,如高脂飼料喂養(yǎng)、酒精損害、毒物損傷、復(fù)合因素等方法,本文分享的是高脂飼料喂養(yǎng)進行非酒精性脂肪肝造模的方法。

        1、實驗準(zhǔn)備

        實驗材料準(zhǔn)備: SD 大鼠40體重200~~220g,清潔級;豬油、雞蛋黃自備;高脂造模飼料;普通飼料

        2、實驗方法

        (1)動物分組及處理 SD 大鼠40只,隨機分為兩組各20只。除正常對照組外,全部給予高脂飲食復(fù)制非酒精性脂肪性肝炎模型。

        (2)高脂飲食由普通飼料加15%豬汕,8%蛋黃粉,2%膽固醇組成,觀察動物的體重、飲食、毛發(fā)、活動情況、肝/體重比等。。

        (3)在造模第4周、8周、18 周分別處死模型組動物各2只,觀察其病理模型形成情況。

        (4)18周末將大鼠用2%戊巴比妥鈉(45mg/kg)腹腔注射,麻醉后下腔靜脈取血,將血標(biāo)本離心后用于血脂檢測;取肝左葉,用10%中性福爾馬林溶液固定

        (5)石惜包埋切片,作肝細織病理學(xué)觀察。

        3、實驗結(jié)果

        (1)動物的一般情況

        實驗期間正常組動物精力充沛,靈活好動,飲食正常,皮毛整潔,體重緩慢增加;

        模型組飲食量大,嗜睡,毛色偏黃,個體較大,體重增長較正常組較快,至8周時,模型組各動物體重較正常組平均重21%,有不同程度的精神萎靡,活動減少,皮毛凌亂。

        (2)體重和肝指數(shù)

        兩組大鼠體重和肝指數(shù),模型組較正常組體重及肝指數(shù)均顯著增加

        (3)血脂

        檢測兩組大鼠的血脂,模型組與正常組相比,有顯著的差異性。

        (4)肝臟病理學(xué)變化

        肉眼觀察:肉眼觀察 正常組大鼠肝臟形態(tài)正常,18周時無一例出現(xiàn)異常。模型組大鼠造模4周起肝臟外形稍飽滿圓鐘,質(zhì)地較脆,色紅;8~12 周肝臟體積增大,包膜緊張,色澤灰黃,切面油膩;18 周時,模型組動物肝臟明顯增大,包膜緊張,邊緣較鈍,質(zhì)地略軟,色變黃,表面呈花斑狀,觸之似泥塊并有油膩感,部分大鼠肝臟有黃白魚的局灶性脂肪沉積。

        光鏡觀察:

        正常組肝小結(jié)構(gòu)正常,肝細胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列。無肝細胞腫脹及脂肪變性。模型組肝組織HE染色顯示:造模4周后大鼠肝臟即有輕微的肝細胞脂肪變性,標(biāo)本還出現(xiàn)匯管區(qū)及小葉內(nèi)炎癥細胞浸潤和散在的點狀壞死;造模8周大鼠多呈中度脂肪變,且炎癥活動積分明顯高于造模4~8 周大鼠,可見到小葉內(nèi)炎癥,炎癥細胞主要以單核細胞為主,炎癥程度明顯加重;造模 18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪變,脂滴分布密度通大,可見大部分旺細胞漿含大脂滴,部分脂滴形成大空泡。將細胞核擠壓至一邊,目以中央靜脈周圍為其:肝小葉結(jié)構(gòu)破壞,肝細胞排列不規(guī)救,并伴大量肝細胞腫脹,部分呈氣球樣變,匯管區(qū)炎癥尚輕微。

        好啦,那關(guān)于非酒精性脂肪肝動物造模的注意事項咱們就講到這里啦,有不懂的操作歡迎隨時留言給我們,如果您也正在準(zhǔn)備進行非酒精性脂肪肝動物造模實驗或有動物造模外包的需求,歡迎選擇為真實實驗而生的普拉特澤生物~

——關(guān)于我們——

普拉特澤自建3000平米的GMP級實驗室
擁有七個大型實驗平臺、碩博士學(xué)歷技術(shù)團隊100余人
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