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腦缺血性疾病（如腦卒中）是全球致殘和致死的主要原因之一，在藥物研發(fā)過程中，腦缺血動物模型作為臨床前研究的關(guān)鍵工具，能夠有效模擬人類腦缺血病理過程，為神經(jīng)保護藥物的篩選和評價提供重要依據(jù)。
普拉特澤生物承接腦缺血模型等動物實驗相關(guān)服務(wù)上萬例，積累了操作大量經(jīng)驗，為大家詳細介紹腦缺血模型在藥物評價中的6大核心指標和標準化操作流程同時為廣大科研工作者開展線上的理論培訓(xùn)與線下實操
可承接動物實驗外包服務(wù)、幫助研究人員獲得更可靠、可重復(fù)的實驗數(shù)據(jù)。

一、腦缺血模型的主要類型

→永久性局灶性腦缺血模型（如MCAO線栓法）

短暫性局灶性腦缺血模型

→全腦缺血模型（如四血管閉塞法）

▲光化學(xué)誘導(dǎo)血栓模型

▲栓塞性腦缺血模型

▲每種模型各有優(yōu)缺點，研究人員需根據(jù)研究目的和藥物作用機制選擇最適合的模型。

二、6大核心評價指標

1. 神經(jīng)功能缺損評分

標準化評分系統(tǒng)：

▲改良神經(jīng)嚴重程度評分(mNSS)

▲Bederson評分

▲Garcia評分

▲肢體不對稱試驗

▲應(yīng)用價值：定量評估藥物對神經(jīng)功能恢復(fù)的改善作用。

2. 腦梗死體積測定

金標準方法：

TTC染色法（2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色）

MRI彌散加權(quán)成像(DWI)

組織病理學(xué)測量

關(guān)鍵點：應(yīng)在不同時間點(24h、72h、7d)多次測量，觀察動態(tài)變化。

3. 血腦屏障通透性評估

●常用方法：

伊文思藍滲出法

熒光素鈉滲透法

免疫組化檢測緊密連接蛋白(occludin、ZO-1)

意義：評估藥物對血腦屏障的保護作用。

4. 細胞凋亡與存活檢測

關(guān)鍵技術(shù)：

●TUNEL染色檢測凋亡細胞

●免疫熒光檢測Caspase-3活性

●Western blot分析Bcl-2/Bax比值

5. 氧化應(yīng)激與炎癥指標

必測指標：

●MDA含量

●SOD活性

炎癥因子(IL-1β、TNF-α、IL-6)水平

小膠質(zhì)細胞活化標志物(Iba-1)

6. 長期神經(jīng)功能恢復(fù)評估

行為學(xué)測試：

▲Morris水迷宮(空間學(xué)習(xí)記憶)

▲旋轉(zhuǎn)棒測試(運動協(xié)調(diào)性)

▲新物體識別測試(認知功能)

▲足失誤測試(感覺運動功能)

三、標準化操作流程

〖模型建立階段〗

動物選擇：SD大鼠/C57BL6小鼠，明確體重、年齡范圍

麻醉與監(jiān)護：規(guī)范麻醉深度，監(jiān)測體溫、呼吸、血氧

手術(shù)標準化：線栓插入深度、缺血時間嚴格控制

〖給藥方案設(shè)計〗

治療時間窗：缺血前預(yù)防性給藥 vs 缺血后治療性給藥

給藥途徑：靜脈注射、腹腔注射、口服等

劑量設(shè)置：至少3個劑量組+陽性對照組

〖樣本采集與處理〗

●時間點選擇：急性期(24h)、亞急性期(3-7d)、慢性期(28d)

●組織處理：規(guī)范灌注固定、切片厚度、染色流程

〖數(shù)據(jù)分析要點〗

●盲法評估：行為學(xué)評分、病理分析采用雙盲法

●統(tǒng)計方法：明確使用t檢驗、ANOVA等統(tǒng)計方法

●數(shù)據(jù)報告：遵循ARRIVE指南

四、常見問題與解決方案

○模型成功率低→ 加強手術(shù)培訓(xùn)，規(guī)范操作細節(jié)

○數(shù)據(jù)變異大→ 嚴格控制動物品系、年齡、環(huán)境因素

○臨床轉(zhuǎn)化率低→ 采用多時間點、多指標綜合評價

五、前沿技術(shù)與發(fā)展趨勢

▲轉(zhuǎn)基因動物模型的應(yīng)用

▲多模態(tài)影像學(xué)動態(tài)監(jiān)測

▲類器官與芯片技術(shù)的結(jié)合

▲人工智能輔助數(shù)據(jù)分析

規(guī)范的腦缺血模型評價是神經(jīng)保護藥物研發(fā)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。通過6大核心指標的系統(tǒng)評價和標準化流程的實施，可顯著提高實驗數(shù)據(jù)的可靠性和臨床轉(zhuǎn)化價值。

如果你總是在做實驗時總會遇上這樣那樣的問題需要幫助時，請記得在腦缺血模型實驗中遇到技術(shù)問題可添加技術(shù)微信：18570028002

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