腦缺血模型造模步驟—下【腦缺血模型外包】
2022-10-26 16:45:39
來源/作者：普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
大家好~今天普拉特澤生物繼續(xù)跟大家一起學(xué)習(xí)腦缺血模型的實驗步驟，上期動物實驗平臺分享了實驗研究中最常用的大腦中動脈栓塞 (MCAO) 模型造模步驟，本文我們繼續(xù)來學(xué)習(xí)另一種被廣泛用于慢性腦缺血研究的動物模型——二血管阻塞慢性腦缺血模型，普拉特澤生物動物實驗平臺為廣大實驗人員提供腦缺血造模實驗外包服務(wù)，歡迎咨詢。
二血管阻塞慢性腦缺血模型是結(jié)扎大鼠雙側(cè)頸總動脈造成腦血流的下降并能較好模擬慢性缺血所致的病理改變，操作簡單、重復(fù)性好、死亡率低，被廣泛用于慢性腦缺血的研究。該模型可造成脫髓鞘改變、軸突丟失、膠質(zhì)細胞增生等白質(zhì)損傷的病理改變。二血管阻塞慢性腦缺血模型的實驗動物選擇上和MCAO一樣，由于雌激素對缺血結(jié)果有影響，一般選用雄性大鼠。最常用的動物是250~300g的雄性 Wistar大鼠。Sprague-Dawley(SD)大鼠和其他品系的大鼠亦可用于本模型的制作。
二血管阻塞慢性腦缺血模型的制作步驟如下：
1、所有操作均在無菌條件下進行。手術(shù)人員應(yīng)戴口罩和無菌手套，穿無菌隔離衣進行手術(shù)操作：
（1）動物呈仰臥位；
（2）頸部正中切口，暴露氣管和雙側(cè)頸總動脈，用眼科鑷分離并挑起頸總動脈；
（2）暴露一側(cè)頸總動脈，將一根外科絲縫線結(jié)扎頸總動脈用同樣的方法分離并結(jié)扎另一側(cè)頸總動脈；
2、手術(shù)操作步驟
(1)將大鼠放入麻醉箱中，用含2%異氟醚的70%氧化亞氮和30%氧氣的混合氣體以5L/min的氧氣流速進行麻醉誘導(dǎo)，3~5min后，大鼠進入麻醉狀態(tài)，之后以1L/min的氧氣流速進行維持。
(2)術(shù)前褪毛，聚維酮碘常規(guī)消毒手術(shù)區(qū)域。
(3)為了控制平均動脈壓、動脈血氣量和血糖含量，應(yīng)同時行尾動脈插管。把2根電極通過小的皮膚切口插入雙側(cè)顳肌，以獲取腦電圖。在整個實驗中，平均動脈血壓和腦電圖的獲取依賴動力實驗系統(tǒng)。
(4)通過尾動脈抽取動脈血，運用動脈血氣體分析儀和血漿葡萄糖測定儀，對血氣和血糖含量進行測定。
(5)在缺血前15 min和缺血后15 min對動脈血氣和血糖含量進行測定，在整個實驗過程中血液氣體含量都保持在正常的生理范圍內(nèi)。
(6)在大鼠腹側(cè)頸部皮膚正中線處做一個切口，小心分離兩側(cè)的頸總動脈和周圍組織以及迷走神經(jīng)。
(7)把直腸溫度探測器插入到直腸中監(jiān)測體溫。熱電耦33G溫度探測器植入顳肌，監(jiān)測頭部溫度。在動物身體和頭部上方的熱光源的幫助下，身體和頭部溫度在整個手術(shù)過程中保持在(37±0.2)℃。
(8)當(dāng)所有的準(zhǔn)備工作已經(jīng)完成時，異氟醚的濃度保持在1%。
(9)在缺血前15min，監(jiān)測血壓中的氣體含量，平均動脈血壓、腦電圖、直腸和頭部溫度，并且保持在正常的生理范圍內(nèi)。
(10)將兩側(cè)頸總動脈通過外科絲縫線5-0結(jié)扎以誘導(dǎo)腦血流低灌注。
(11)縫合皮膚，結(jié)束麻醉過程。大鼠仍然需要進行70%氧化亞氮和30%氧氣的混合氣體輔助呼吸，并且保持顳肌和直腸的溫度在37℃，直到它從麻醉狀態(tài)清醒過來，此過程通常需要30~60min。移除頭部和直腸溫度探測器后，把大鼠放回到其原來的籠子。
(12)密切監(jiān)控大鼠呼吸，直到呼吸恢復(fù)平穩(wěn)。1~2h后，大鼠可以轉(zhuǎn)移至動物房，常規(guī)供應(yīng)食物和水。
(13)頸總動脈閉塞分步法：為避免腦血流量突然出現(xiàn)相對嚴(yán)重的下降，可按以下步驟逐步閉塞頸總動脈。大鼠用異氟醚麻醉，頸腹正中切口。暴露左側(cè)頸總動脈，與迷走神經(jīng)輕輕分離，用三條結(jié)扎線(2-0)閉塞。1周后，做一個新的切口，右頸動脈同樣被阻塞。
那二血管阻塞慢性腦缺血模型的造模步驟小編就介紹到這里啦~希望呢能夠給您在造模過程中遇到的問題帶來一定的幫助，如果您對腦缺血模型還有更多的疑問或腦缺血模型外包的需求，歡迎聯(lián)系普拉特澤生物客服人員~我們下期見！
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