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前兩篇我們總結(jié)了檢測EDU技術(shù)的方法以及EDU檢測細(xì)胞增殖結(jié)果是如何分析的，今天來學(xué)習(xí)細(xì)胞增殖檢測時關(guān)于EdU法及其應(yīng)用，讓我們一起來回顧一下看看吧，溫故而知新。

一、了解細(xì)胞增殖的新視角 —— 檢測EDU技術(shù)的方法

二、EDU檢測細(xì)胞增殖結(jié)果如何分析？

鏈接奉上，大家快點踩著普拉特澤的肩膀去摘蘋果吧！那現(xiàn)在我們來接著總結(jié)：

EdU法是一種基于細(xì)胞內(nèi)新合成DNA的標(biāo)記方法，用于評估細(xì)胞的增殖活性。之前我們也提到EdU的原理簡介，讓我們再務(wù)實一下基礎(chǔ)吧！過下面將詳細(xì)介紹EdU法的原理和應(yīng)用。

原理： EdU（5-乙炔基-2’-脫氧尿苷）是一種類似于脫氧尿苷（dU）的核苷酸，它具有一個乙炔基團(tuán)。在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加EdU后，細(xì)胞會主動攝取EdU并將其嵌入到新合成的DNA鏈中。與傳統(tǒng)的BrdU法不同，EdU法不需要使用酸性脫氧核糖核酸酶（DNase）來使DNA鏈斷裂，因此可以避免DNA斷裂的非特異性效應(yīng)。

在EdU法中，通過使用熒光染料或特定的抗體與EdU結(jié)合，可以將EdU標(biāo)記的DNA可視化。這種結(jié)合可以通過點擊化學(xué)反應(yīng)實現(xiàn)，其中EdU上的乙炔基與標(biāo)記物上的點擊試劑（例如，含有偶氮基團(tuán)的染料或生物素）發(fā)生共軛反應(yīng)。通過熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞術(shù)分析，可以計算標(biāo)記陽性細(xì)胞的數(shù)量，從而評估細(xì)胞的增殖活性。

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EdU法在細(xì)胞生物學(xué)研究中有廣泛的應(yīng)用。以下是一些常見的應(yīng)用領(lǐng)域：

細(xì)胞增殖評估：通過檢測EdU標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)量，可以定量評估細(xì)胞的增殖活性。這對于研究細(xì)胞周期的調(diào)控機(jī)制、細(xì)胞增殖的動力學(xué)過程以及評估細(xì)胞增殖抑制劑的效果非常有用。

組織再生研究：EdU法可以用于研究組織再生過程中的細(xì)胞增殖。例如，在小鼠肝臟再生研究中，可以通過注射EdU來標(biāo)記再生肝細(xì)胞，并通過檢測EdU標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)量來評估肝臟再生的程度。

腫瘤生長研究：EdU法可以用于研究腫瘤細(xì)胞的增殖活性。通過標(biāo)記腫瘤細(xì)胞中的EdU，可以觀察腫瘤細(xì)胞的增殖速率，并評估抗腫瘤藥物的療效。

發(fā)育過程研究：EdU法可以用于研究發(fā)育過程中的細(xì)胞增殖。例如，在胚胎發(fā)育研究中，可以通過注射EdU來標(biāo)記正在增殖的細(xì)胞，并通過檢測EdU標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)量來研究胚胎發(fā)育的動態(tài)過程。

關(guān)于EdU 檢測應(yīng)用:

【1】將EdU作為細(xì)胞增殖的分子探針，應(yīng)用于高含量的siRNA (high-content siRNA, HCS)篩選實驗，對細(xì)胞增殖進(jìn)行評估。

【2】Wiebusch等使用EdU和流式細(xì)胞儀研究人巨細(xì)胞病毒細(xì)胞周期的基因表達(dá)。EdU在用于檢測細(xì)胞增殖的很多實驗中發(fā)揮了突出的作用，展現(xiàn)了其廣闊的應(yīng)用前景。

【3】EdU標(biāo)記技術(shù)在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用是最基本的，Hiraoka等【3】用EdU標(biāo)記非雄激素依賴型前列腺癌PC3細(xì)胞, 根據(jù)低氯離子濃度的培養(yǎng)基組, DNA中有EdU摻入的細(xì)胞數(shù)目較對照組減少, 得出低氯離子濃度會延長細(xì)胞周期的各個階段, 而導(dǎo)致整個細(xì)胞周期的終止。

【4】Zeng等用EdU標(biāo)記法檢測成體動物神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞增殖, 并與傳統(tǒng)的BrdU標(biāo)記方法相對照, 充分肯定了EdU用于檢測細(xì)胞增殖的可行性。

【5】在植物細(xì)胞培養(yǎng)中, Kotogány等通過用EdU標(biāo)記植物細(xì)胞（玉米、水稻、擬南芥等）進(jìn)行實驗, 相對于3H-TdR和BrdU，EdU檢測植物細(xì)胞增殖不需要進(jìn)行細(xì)胞壁的消化，節(jié)省了DNA變性的步驟，減少了整個細(xì)胞增殖檢測實驗的時間, 更有效并真實地展示了細(xì)胞、細(xì)胞核以及染色體的形態(tài)學(xué)特征。

綜上所述，EdU標(biāo)記S期細(xì)胞及檢測細(xì)胞增殖是一種可靠、通用、快速、簡單以及沒有放射性的方法，同時可以結(jié)合其他標(biāo)記進(jìn)行多參數(shù)的分析, 具有簡單、快速、準(zhǔn)確和兼容的特點, 適合多種研究方式和多層次分析, 這一方法必將在細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)和病毒復(fù)制等方面的研究中發(fā)揮重要作用

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