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高脂飲食誘導(dǎo)NAFLD模型的5大核心指標(biāo)及檢測(cè)方法【全面解析】

非酒精性脂肪肝（NAFLD）是全球最常見(jiàn)的慢性肝病之一，而高脂飲食（HFD）誘導(dǎo)的動(dòng)物模型是研究NAFLD發(fā)病機(jī)制和藥物干預(yù)的重要工具。
普拉特澤生物為廣大生命科學(xué)研究人員提供非酒精性脂肪肝小鼠實(shí)驗(yàn)，可根據(jù)實(shí)方案的要求選擇不同的檢測(cè)方法，本文就跟大家一起詳細(xì)介紹——高脂飲食誘導(dǎo)NAFLD模型的5大核心指標(biāo)
并提供實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法，幫助研究者準(zhǔn)確評(píng)估模型建立是否成功。
1. 肝臟組織病理學(xué)指標(biāo)（HE染色 & 油紅O染色）

檢測(cè)方法

⑴HE染色（蘇木精-伊紅染色）：觀察肝細(xì)胞脂肪變性、炎癥浸潤(rùn)和氣球樣變。

⑵油紅O染色：特異性染色肝組織中的脂滴，定量脂肪沉積程度。

⑶NAS評(píng)分（NAFLD Activity Score）：根據(jù)脂肪變性（0-3分）、炎癥（0-3分）和肝細(xì)胞氣球樣變（0-2分）綜合評(píng)估NAFLD嚴(yán)重程度。

意義

脂肪變性 ≥5% 可判定為NAFLD模型成功。

NAS評(píng)分 ≥4分提示NASH（非酒精性脂肪性肝炎）。

2. 血清生化指標(biāo)（ALT、AST、TG、TC）

檢測(cè)方法

①ALT（丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶） & AST（天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）：采用ELISA或生化分析儀檢測(cè)，反映肝損傷程度

②TG（甘油三酯） & TC（總膽固醇）：評(píng)估血脂代謝異常，常用酶比色法測(cè)定。

意義

⑴ALT、AST升高提示肝細(xì)胞損傷（通常HFD喂養(yǎng)8-12周后顯著上升）。

⑵TG、TC水平升高表明脂代謝紊亂，是NAFLD的重要特征。

3. 肝臟脂質(zhì)含量（肝組織TG、TC測(cè)定）

①檢測(cè)方法

肝組織勻漿法：取肝組織勻漿后，用試劑盒（如Triglyceride Assay Kit）測(cè)定TG、TC含量。

②計(jì)算公式：

肝組織TG (mg/g)=測(cè)得TG濃度 (mg/mL)×勻漿體積 (mL)肝組織重量 (g)肝組織TG (mg/g)= 肝組織重量 (g)測(cè)得TG濃度 (mg/mL)×勻漿體積 (mL)

③意義

肝組織TG含量 >10 mg/g 表明顯著脂肪沉積。

與血清TG結(jié)合分析，可評(píng)估肝臟脂質(zhì)代謝異常程度。

4. 炎癥因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）

⑴檢測(cè)方法

⒈ELISA法：定量檢測(cè)血清或肝組織勻漿中的炎癥因子水平。

⒉qPCR/Western Blot：檢測(cè)肝臟中炎癥相關(guān)基因（如TNF-α、IL-6）的表達(dá)。

⑵意義

TNF-α、IL-6升高表明肝臟炎癥反應(yīng)，提示NASH進(jìn)展。

結(jié)合HE染色（炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)）可更全面評(píng)估炎癥程度。

5. 肝纖維化指標(biāo)（膠原沉積、α-SMA、羥脯氨酸）

檢測(cè)方法

▲天狼星紅染色：觀察膠原纖維沉積（I、III型膠原）。

▲α-SMA免疫組化：檢測(cè)肝星狀細(xì)胞活化（纖維化標(biāo)志物）。

▲羥脯氨酸測(cè)定：定量肝組織膠原含量（纖維化程度）。

意義

▲纖維化評(píng)分（Ishak或METAVIR系統(tǒng)）用于評(píng)估NAFLD向肝纖維化進(jìn)展。

▲α-SMA陽(yáng)性率升高提示肝星狀細(xì)胞激活，纖維化啟動(dòng)。

6.結(jié)論

高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD模型成功與否，需綜合評(píng)估 肝臟病理、血清生化、脂質(zhì)代謝、炎癥反應(yīng)和纖維化 這5大核心指標(biāo)。
通過(guò) HE染色、油紅O染色、ALT/AST檢測(cè)、TG/TC測(cè)定、ELISA（炎癥因子）和天狼星紅染色等方法，可系統(tǒng)分析NAFLD

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