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大家好！今天普拉特澤生物繼續(xù)帶大家一起學(xué)習(xí)新實驗——甲苯胺藍(lán)染色，甲苯胺藍(lán)染色是病理學(xué)中常用的特殊染色，用于顯示各種組織成分、細(xì)胞等。普拉特澤生物病理實驗平臺長期為大家提供甲苯胺藍(lán)染色代做外包服務(wù)，本文跟大家分享動物組織樣本甲苯胺藍(lán)染色的實驗步驟：

一、甲苯胺藍(lán)染色實驗原理與準(zhǔn)備

甲苯胺藍(lán)染色原理：甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue)是一種常用的人工合成染料，屬于醌亞胺染料類。這類染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個發(fā)色團(tuán)，從而成色原顯色。甲苯胺藍(lán)中的陽離子有染色作用，組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個發(fā)色團(tuán)，還含有兩個助色團(tuán)，能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類，幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力，使切片上的組織細(xì)胞著色，可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。甲苯胺藍(lán)染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸鹽法)由于硼酸鹽緩沖液呈強堿性，更利于組織細(xì)胞的著色。

儀器準(zhǔn)備：生物組織攤烤片機、切片機、顯微鏡、蓋玻片、載玻片

試劑準(zhǔn)備：甲苯胺藍(lán)染色液、中性樹膠、無水乙醇、二甲苯

二、甲苯胺藍(lán)染色實驗步驟（以動物組織為例）

1、脫蠟

（1）70℃烤片5 min；

（2）二甲苯（I）中脫蠟10 min；

（3）二甲苯（II）中脫蠟10 min；

（4）100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；

5) 100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；

2、水化

（1）95%乙醇中水化1 min；

（2）85%乙醇中水化1 min；

（3）75%乙醇中水化1 min；

（4）蒸餾水中水化待用；

3、染色

（1）甲苯胺藍(lán)染色液染色30 min；

（2）流水沖洗2 min；

（3）1%鹽酸酒精分化至軟骨細(xì)胞呈紫藍(lán)色清楚可見；

（4）流水沖洗切片5 min；

（4）蒸餾水過洗1-2 s；

4、脫水

（1）85%乙醇脫水1 min；

（2）95%乙醇脫水1 min；

（3）無水乙醇脫水1 min；

（4）無水乙醇脫水1 min；

5、透明

（1）二甲苯（I）透明2 min；

（2）二甲苯（II）再次透明2 min；

6、封片、鏡檢

在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠，蓋上蓋玻片封固，顯微鏡下觀察拍照。

好啦，動物組織的甲苯胺藍(lán)染色實驗步驟咱們就介紹完啦，如果您也對甲苯胺藍(lán)染色感興趣或正在準(zhǔn)備甲苯胺藍(lán)染色實驗的話歡迎隨時咨詢普拉特澤生物~

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