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大家好！今天普拉特澤生物繼續(xù)帶大家一起學(xué)習(xí)新實(shí)驗(yàn)——甲苯胺藍(lán)染色，甲苯胺藍(lán)染色是病理學(xué)中常用的特殊染色，用于顯示各種組織成分、細(xì)胞等。普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)長(zhǎng)期為大家提供甲苯胺藍(lán)染色代做外包服務(wù)，本文跟大家分享植物組織樣本甲苯胺藍(lán)染色的實(shí)驗(yàn)步驟：

一、甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)原理與準(zhǔn)備

甲苯胺藍(lán)染色原理：甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue)是一種常用的人工合成染料，屬于醌亞胺染料類(lèi)。這類(lèi)染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個(gè)發(fā)色團(tuán)，從而成色原顯色。甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用，組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán)，還含有兩個(gè)助色團(tuán)，能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類(lèi)，幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)組織產(chǎn)生染色力，使切片上的組織細(xì)胞著色，可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。甲苯胺藍(lán)染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸鹽法)由于硼酸鹽緩沖液呈強(qiáng)堿性，更利于組織細(xì)胞的著色。

儀器準(zhǔn)備：生物組織攤烤片機(jī)、切片機(jī)、顯微鏡、蓋玻片、載玻片

試劑準(zhǔn)備：甲苯胺藍(lán)染色液、中性樹(shù)膠、無(wú)水乙醇、二甲苯

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二、甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)步驟（以植物組織為例）

1、組織脫蠟

（1）70℃烤片5 min；

（2）二甲苯（I）中脫蠟10 min；

（3）二甲苯（II）中脫蠟10 min；

（4）100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；

（5）100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；

2、組織水化

（1）95%乙醇中水化1 min；

（2）85%乙醇中水化1 min；

（3）75%乙醇中水化1 min；

（4）蒸餾水中水化待用；

3、切片染色

（1）甲苯胺藍(lán)染色30 min；

（2）流水沖洗2 min；

（3）1%鹽酸酒精分化至細(xì)胞呈紫藍(lán)色清楚可見(jiàn)；

（4）流水沖洗切片5 min；

（5）蒸餾水過(guò)洗1-2 s；

4、樣本脫水

（1）85%乙醇脫水1 min；

（2）95%乙醇脫水1 min；

（3）無(wú)水乙醇脫水1 min；

（4）無(wú)水乙醇脫水1 min；

5、透明

（1）二甲苯（I）透明2 min；

（2）二甲苯（II）再次透明2 min；

6、封片、鏡檢

在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹(shù)膠，蓋上蓋玻片封固，顯微鏡下觀(guān)察拍照。

好啦，植物組織的甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)步驟咱們就介紹完啦，如果您也對(duì)甲苯胺藍(lán)染色感興趣或正在準(zhǔn)備甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)的話(huà)歡迎隨時(shí)咨詢(xún)普拉特澤生物~

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