非酒精性脂肪肝模型造模時間
2025-04-11 14:27:58
來源/作者：普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
非酒精性脂肪肝病(NAFLD)動物模型的造模時間是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素。普拉特澤生物動物平臺可承接各種動物實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，包括檢測裸鼠皮下成瘤、小鼠腸炎模型構(gòu)建、糖尿病模型等實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，本文是我們在承接數(shù)動物實(shí)驗(yàn)中，對操作過程中的常見問題與大家留言咨詢最多的問題進(jìn)行回答，快來收藏吧！
本文將詳細(xì)介紹不同類型NAFLD模型的最佳造模時間，幫助研究者準(zhǔn)確掌握從單純性脂肪肝到NASH、肝纖維化的進(jìn)展周期。
一、常見NAFLD模型造模時間對比
1. 單純性脂肪肝研究(Steatosis)
①推薦模型：普通高脂飲食(HFD)
②最佳時間：6-8周
③特征：肝細(xì)胞脂肪變性(油紅O染色陽性)
④輕度ALT升高(約1.5-2倍)
④無顯著炎癥或纖維化
2. NASH(脂肪性肝炎)研究
⑴推薦模型：HFHC或MCD飲食
⑵最佳時間：
HFHC：12-16周
MCD：3-4周
特征：
NAS評分≥4分
明顯炎癥浸潤(HE染色)
TNF-α、IL-6等炎癥因子升高
3.肝纖維化研究
推薦模型：HFHC+HFD或CCL4聯(lián)合
最佳時間：
HFHC：20-24周
HFD+CCL4：8-12周
特征：
天狼星紅染色陽性
α-SMA表達(dá)增加
羥脯氨酸含量顯著升高
二、影響造模時間的關(guān)鍵因素
1.動物品系差異
⑴C57BL/6小鼠：最常用，對高脂飲食敏感
⑵SD大鼠：需要更長時間(通常比小鼠延長30-50%)
2.飲食配方差異
⑴脂肪含量(40% vs 60%)
⑵是否添加膽固醇(顯著加速NASH進(jìn)展)
⑶是否聯(lián)合果糖/葡萄糖水(加重代謝異常)
3.環(huán)境因素
⑴溫度(最佳22±2℃)
⑵光照周期(建議12h/12h)
⑶飼養(yǎng)密度(每籠不超過5只)
三、造模成功的判定標(biāo)準(zhǔn)
1.基本標(biāo)準(zhǔn)
肝指數(shù)(肝重/體重)增加20%以上
血清ALT>50 U/L
肝臟TG>10 mg/g組織
2.組織學(xué)標(biāo)準(zhǔn)
油紅O染色陽性面積>20%
NAS評分≥3分(脂肪變性1-3分+炎癥0-3分+氣球樣變0-2分)
3.分子標(biāo)志物
TNF-α水平升高2倍以上
α-SMA陽性細(xì)胞數(shù)增加
五、實(shí)驗(yàn)設(shè)計建議
1.時間點(diǎn)設(shè)置
至少設(shè)置3個時間點(diǎn)(如4、8、12周)
處死前禁食6小時(不禁水)
2.樣本量計算
每組至少8-10只動物
考慮20%的損耗率
對照設(shè)置
正常飲食對照組
模型對照組
陽性藥物對照組(如適用)
六、常見問題解答
Q：為什么我的HFD模型8周還沒有明顯脂肪變性？
A：可能原因：
動物品系不敏感(建議用C57BL/6)
飼料脂肪含量不足(建議≥45%)
環(huán)境溫度過高(影響代謝)
Q：MCD模型體重下降嚴(yán)重怎么辦？
A：解決方案：
縮短造模時間(2-4周)
改用MCS(膽堿缺乏但含蛋氨酸)飲食
增加監(jiān)測頻率(每周2次稱重)
Q：如何判斷纖維化是否形成？
A：金標(biāo)準(zhǔn)：
天狼星紅染色(膠原沉積)
羥脯氨酸含量測定
肝硬度檢測(如FibroScan)
七、總結(jié)與展望
掌握NAFLD模型的精準(zhǔn)造模時間是研究成功的關(guān)鍵。根據(jù)研究目的：
單純脂肪肝：HFD 6-8周
NASH：HFHC 12-16周
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