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流式檢測(cè)細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)——細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)外包

流式檢測(cè)細(xì)胞周期的注意事項(xiàng)由普拉特澤生物根據(jù)承接的幾千例流式檢測(cè)細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)和各種實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的技術(shù)咨詢(xún)總結(jié)而來(lái)，普拉特澤生物專(zhuān)注提供線(xiàn)下生物實(shí)驗(yàn)研究，積累了大量經(jīng)驗(yàn)，為廣大科研工作者提流式檢測(cè)細(xì)胞周期等各類(lèi)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)外包。

那么今天的流式檢測(cè)細(xì)胞周期注意事項(xiàng)我們分為兩個(gè)方面為大家解讀：

一、流式檢測(cè)細(xì)胞樣本的制備的注意事項(xiàng)

1、根據(jù)不同的檢測(cè)細(xì)胞調(diào)整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境，注意一定要無(wú)菌的環(huán)境培養(yǎng)。

2、培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，以對(duì)數(shù)期處理為宜，避免細(xì)胞量過(guò)少導(dǎo)致收集細(xì)胞量不足或者細(xì)胞量過(guò)多導(dǎo)致細(xì)胞開(kāi)始大量死亡造成的實(shí)驗(yàn)誤差。

2、流式檢測(cè)細(xì)胞周期上機(jī)檢測(cè)所需收集細(xì)胞量較多，收集細(xì)胞時(shí)盡量多收集一些

3、流式檢測(cè)對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作輕緩，避免過(guò)多地?fù)p傷、弄破細(xì)胞。

4、本實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作輕緩，避免過(guò)多地?fù)p傷細(xì)胞。

5、細(xì)胞周期待測(cè)細(xì)胞盡量要獲得單個(gè)細(xì)胞，避免DNA的降解。

6、樣本最關(guān)鍵的就是減少碎片(EDTA/不可過(guò)度吹打/離心rpm)。PI既能與DNA結(jié)合，又能與RNA結(jié)合，所以要用RNase降解。PI質(zhì)量及RNase所加量很重要，建議用商品化試劑。

7、污染脫氧核糖核酸酶會(huì)降解DNA，故玻璃器皿和試劑要干凈滅菌。

8、染液等物質(zhì)有一定毒性，注意防護(hù)。

流式檢測(cè)細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

二、流式檢測(cè)時(shí)的注意事項(xiàng)：

1、固定時(shí)必須預(yù)冷PBS重懸打入無(wú)水乙醇中，二者順序不可顛倒。

2、固定后細(xì)胞雖然可以保存較長(zhǎng)時(shí)間后再上機(jī)檢測(cè)，為避免不可控因素影響最好盡早上機(jī)檢測(cè)。

3、進(jìn)樣速度：一般檢測(cè)細(xì)胞濃度調(diào)整為2*10^5到2*10^6/mL，進(jìn)樣速度為低速。若峰形較寬，可能就是進(jìn)樣速度太快。

4、儀器質(zhì)控定期做，盡可能排除因機(jī)器設(shè)置引起的峰形加寬。排除粘連細(xì)胞(FL2-A/FL2-W)。

5、通過(guò)電壓脈沖信號(hào)的寬度和面積區(qū)別實(shí)體組織標(biāo)本中的粘連細(xì)胞群體，最大程度的減少粘連細(xì)胞帶來(lái)的假陽(yáng)性結(jié)果。
到這里，用流式檢測(cè)細(xì)胞周期操作過(guò)程中我們要注意的問(wèn)題就講完了，學(xué)習(xí)流式檢測(cè)細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)步驟可點(diǎn)擊此處跳轉(zhuǎn)，如果朋友們還有新的問(wèn)題或要補(bǔ)充的注意事項(xiàng)可以隨時(shí)聯(lián)系我們的客服小姐姐補(bǔ)充交流學(xué)習(xí)哦。當(dāng)然如果您有細(xì)胞周期檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)外包的需求，普拉特澤隨時(shí)為您服務(wù)。

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